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目標(biāo)區(qū)域捕獲

技術(shù)簡介

Target-seq是指通過多重PCR方法對目標(biāo)區(qū)域進(jìn)行富集，結(jié)合高通量測序和生物信息方法對目標(biāo)區(qū)域進(jìn)行序列測定和分析的一種技術(shù)。

檢測原理

送樣要求

注：區(qū)域＞10K，每增加10K，體積增加10uL。

技術(shù)參數(shù)

技術(shù)優(yōu)勢

（1）信息量大：可以完整覆蓋整個基因組序列，獲得高頻SNP的分型數(shù)據(jù)，以及發(fā)現(xiàn)個體特有的變異。

（2）針對性強(qiáng)：可針對幾Kb-200 Kb的基因連續(xù)區(qū)間，外顯子靶標(biāo)以及客戶指定位點(diǎn)進(jìn)行一次性捕獲。

（3）成本較低：對數(shù)百個樣品進(jìn)行混樣建庫，大大降低了研究成本。

（4）效率極高：比起使用Sanger法的候選基因測序方法，基于二代測序技術(shù)的目標(biāo)區(qū)域測序更加快速、精確、高效。

（5）適用范圍廣：Target-seq可針對有參物種DNA樣本進(jìn)行檢測，有效替代芯片檢測。

案例分析

基于目標(biāo)區(qū)域驗(yàn)證檢測HLA-DRB1多態(tài)性與皮膚肌炎的遺傳聯(lián)系^[1]

研究背景

人白細(xì)胞抗原(HLA)的遺傳變異在皮膚肌炎（DM）發(fā)病機(jī)制中起著重要作用，本研究的目的是調(diào)查中國HLA II類DM患者與DM的關(guān)系。

研究方法

在中日友好醫(yī)院隨機(jī)抽取224例糖尿病患者和300例健康對照者。采用測序技術(shù)對HLA-DRB1等位基因進(jìn)行高分辨率分型，采用PCR序列特異性引物(SSP)測定HLA-DQA1和HLA-DQB1等位基因。

研究結(jié)果

研究結(jié)果表明，HLA-DRB1*09:01和HLA-DRB1*12:01等位基因可能導(dǎo)致中國漢族人群成人DM的易感性。此外，具有抗黑色素瘤鑒別相關(guān)基因5 (anti-MDA5)的DM患者HLA-DRB1*12:01的頻率明顯高于不具有anti-MDA5的患者。，因此推斷HLA-DRB1*12:01基因型與DM患者anti-MDA5抗體存在顯著相關(guān)。

參考文獻(xiàn)

Jinming Lin, Yongbiao Zhang, Qinglin Peng, et al. Genetic Association of HLA-DRB1 Multiple Polymorphisms with Dermatomyositis in Chinese Population[J]. HLA. 2017, 90(6):354-359